Mitrovske zadušnice se uvek obeležavaju u subotu uoči praznika Mitrovdan koji je posvećen Svetom velikomučeniku Dimitriju.

Tog dana služi se pomen za preminule u crkvi na svetoj liturgiji, a običaj je da se potom odlazi na groblja, gde sveštenici kade grobove i čitaju molitve.

Običaj je da danas vernici iznose na groblje kuvano žito i crno vino i obavezno pale sveće.

Inače, u crkvenoj godini postoje četiri zadušna dana: Zadušnice pred Vaskršnji post (uoči početka Velikog posta), Duhovske zadušnice (uoči praznika Svete Trojice), Miholjske zadušnice (uoči Miholjdana) i Mitrovske zadušnice (uoči Mitrovdana).